Recherche récemment publiée dans la revue chimie analytique Il considère les signatures métaboliques des cellules dendritiques (DC), que les scientifiques souhaitent analyser en raison de la relation des DC avec le système immunitaire et de leur capacité à développer des stratégies de modulation immunitaire (1). La nouvelle plate-forme de spectrométrie de masse à haute résolution à ionisation par électrospray secondaire (SESI-HRMS) a permis l’analyse de l’espace de tête des DC immatures et activées en temps réel, a déclaré l’équipe de recherche, basée principalement à Bâle, en Suisse.

Selon l’étude, les CD échantillonnent et antigènent les cellules du système immunitaire chez les animaux, ce qui les rend indispensables en termes de fonctions immunitaires et de mémoire, mais il existe certaines limites dans la quantification des métabolites, telles que la préparation d’échantillons à forte intensité de main-d’œuvre (1). La chromatographie liquide et gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (LC-MS et GC-MS, respectivement) ont été utilisées dans des expériences ciblées et non ciblées, mais nécessitent l’utilisation de substrats marqués par des isotopes pour recueillir des informations sur les processus dynamiques DC. Ces méthodes présentent également des inconvénients dans la préparation des échantillons, en termes de temps.

Les chercheurs décrivent SESI, une méthode d’ionisation douce, comme étant capable de fonctionner à pression ambiante et de détecter les composés organiques volatils (COV) dans la gamme des parties par billion. En combinaison avec un HRMS, a déclaré l’équipe, cette approche s’est avérée plus rapide, plus sensible, non invasive et peut être réalisée en temps réel avec une préparation minimale des échantillons (1). Trois études distinctes ont été réalisées pour les besoins de ce rapport, la première mesurant les COV libérés par les CD après stimulation par deux bactéries surnageantes de colile deuxième et le troisième traitent des émissions de carbone du glucose marqué, avec des analyses en temps réel sur 4 heures et après 24 heures d’incubation.

Bien que ces essais pilotes aient démontré les avantages du SESI-HRMS, l’équipe de recherche a reconnu que les limites du cadre technique devaient être abordées. Par exemple, ils ont déclaré que l’automatisation des vannes de commutation entre les flacons de culture cellulaire améliorerait l’efficacité des mesures et de l’acquisition des données. Ils étaient également préoccupés par l’évaporation du milieu de culture cellulaire pendant les longues séances expérimentales (1). Mais l’expérience a détecté des différences dans les profils métaboliques des DC immatures par rapport aux DC activées, et a entraîné une modification « significative » des voies du cycle TCA, du métabolisme de l’acide α-linolénique et de la dégradation de la valine, de la leucine et de l’isoleucine.

Dans l’ensemble, la plate-forme offrait une « approche complémentaire attrayante aux méthodes métabolomiques standard », selon les chercheurs, pour plusieurs raisons supposées améliorer SESI-HRMS par rapport à la LC-MS ou GC-MS conventionnelle. Fournissant une évaluation du métabolisme des DC associées aux cellules immunitaires, l’étude a conclu que des informations précieuses peuvent être nouvellement communiquées pour supprimer la «diaphonie» et souligner le rôle vital des DC dans les stratégies de modulation immunitaire.

référence

(1) Arnold, K. Dehio, P. ; Lotscher, J.; et coll. Analyse en temps réel des métabolites volatils des cellules dendritiques. anal. chim. 2023Et 95 (25), 9415-9421. EST CE QUE JE: 10.1021/acs.analchem.3c00516